1. Tujuan: Prosedur ini bertujuan untuk menyediakan prosedur piawai untuk operasi aseptik dan perlindungan bilik steril.
2. Skop Permohonan: Makmal Ujian Biologi
3. Orang yang Bertanggungjawab: Penguji Penyelia QC
4. Definisi: Tiada
5. Langkah berjaga -jaga keselamatan
Ketat melakukan operasi aseptik untuk mencegah pencemaran mikrob; Pengendali harus mematikan lampu UV sebelum memasuki bilik steril.
6.Procedures
6.1. Bilik steril harus dilengkapi dengan bilik operasi steril dan bilik penampan. Kebersihan bilik operasi steril harus mencapai kelas 10000. Suhu dalaman harus dikekalkan pada 20-24 ° C dan kelembapan harus dikekalkan pada 45-60%. Kebersihan bangku bersih harus mencapai Kelas 100.
6.2. Bilik steril perlu dibersihkan, dan ia dilarang keras untuk menumpuk serpihan untuk mencegah pencemaran.
6.3. Ketat menghalang pencemaran semua peralatan pensterilan dan media budaya. Mereka yang tercemar harus berhenti menggunakannya.
6.4. Bilik steril hendaklah dilengkapi dengan pembasmian kuman kepekatan kerja, seperti larutan 5% Cresol, 70% alkohol, penyelesaian chlormethionine 0.1%, dll.
6.5. Bilik steril perlu disterilkan dan dibersihkan dengan disinfektan yang sesuai untuk memastikan kebersihan bilik steril memenuhi keperluan.
6.6. Semua instrumen, instrumen, hidangan dan barang -barang lain yang perlu dibawa ke dalam bilik steril hendaklah dibungkus dengan ketat dan disterilkan oleh kaedah yang sesuai.
6.7. Sebelum memasuki bilik steril, kakitangan mesti mencuci tangan dengan sabun atau pembasmi kuman, dan kemudian berubah menjadi pakaian kerja khas, kasut, topi, topeng dan sarung tangan di bilik penampan (atau mengelap tangan mereka lagi dengan 70% etanol) sebelum memasuki bilik steril. Melaksanakan operasi di ruang bakteria.
6.8. Sebelum menggunakan bilik steril, lampu ultraviolet di dalam bilik steril mesti dihidupkan untuk penyinaran dan pensterilan selama lebih dari 30 minit, dan bangku bersih mesti dihidupkan untuk bertiup udara pada masa yang sama. Selepas operasi selesai, bilik steril perlu dibersihkan dalam masa dan kemudian disterilkan oleh cahaya ultraviolet selama 20 minit.
6.9. Sebelum pemeriksaan, pembungkusan luar sampel ujian perlu disimpan secara utuh dan tidak boleh dibuka untuk mencegah pencemaran. Sebelum pemeriksaan, gunakan bola kapas alkohol 70% untuk membasmi permukaan luar.
6.10. Semasa setiap operasi, kawalan negatif perlu dilakukan untuk memeriksa kebolehpercayaan operasi aseptik.
6.11. Apabila menyerap cecair bakteria, anda mesti menggunakan bola sedutan untuk menyerapnya. Jangan sentuh jerami secara langsung dengan mulut anda.
6.12. Jarum inokulasi mesti disterilkan oleh api sebelum dan selepas setiap penggunaan. Selepas penyejukan, budaya boleh disuntik.
6.13. Jerami, tiub ujian, hidangan petri dan perkakas lain yang mengandungi cecair bakteria harus direndam dalam baldi pensterilan yang mengandungi larutan lysol 5% untuk pembasmian kuman, dan dibawa dan dibilas selepas 24 jam.
6.14. Sekiranya terdapat cecair bakteria yang tumpah di atas meja atau lantai, anda harus segera mencurahkan larutan asid karbola 5% atau 3% lysol di kawasan yang tercemar selama sekurang -kurangnya 30 minit sebelum merawatnya. Apabila pakaian dan topi kerja tercemar dengan cecair bakteria, mereka harus diambil segera dan dibasuh selepas pensterilan stim tekanan tinggi.
6.15. Semua item yang mengandungi bakteria hidup mesti dibasmi kuman sebelum dibilas di bawah paip. Ia dilarang keras untuk mencemarkan pembetung.
6.16. Bilangan koloni di bilik steril perlu diperiksa setiap bulan. Dengan bangku bersih terbuka, ambil beberapa hidangan petri steril dengan diameter dalaman 90 mm, dan aseptik menyuntik kira -kira 15 ml medium budaya agar nutrien yang telah dicairkan dan disejukkan hingga kira -kira 45 ° C. Selepas pemejalan, letakkannya terbalik pada 30 hingga 35 inkubasi selama 48 jam dalam inkubator ℃. Selepas membuktikan kemandulan, ambil 3 hingga 5 plat dan letakkan di sebelah kiri, tengah dan kanan kedudukan kerja. Selepas membuka penutup dan mendedahkannya selama 30 minit, letakkannya terbalik dalam inkubator 30 hingga 35 ° C selama 48 jam dan bawa mereka keluar. memeriksa. Bilangan purata bakteria pelbagai di atas pinggan di kawasan bersih kelas 100 tidak boleh melebihi 1 koloni, dan jumlah purata di bilik bersih kelas 10000 tidak boleh melebihi 3 koloni. Sekiranya had melebihi, bilik steril harus dibasmi secara menyeluruh sehingga pemeriksaan berulang memenuhi keperluan.
7. Rujuk Bab (Kaedah Pemeriksaan Kemandulan) dalam "Kaedah Pemeriksaan Kebersihan Dadah" dan "Amalan Operasi Standard China untuk Pemeriksaan Dadah".
8. Jabatan Pengedaran: Jabatan Pengurusan Kualiti
Panduan Teknikal Bilik Bersih:
Selepas mendapatkan persekitaran steril dan bahan steril, kita mesti mengekalkan keadaan steril untuk mengkaji mikroorganisma yang diketahui atau menggunakan fungsi mereka. Jika tidak, pelbagai mikroorganisma dari luar dapat dengan mudah dicampur. Mencegah pencemaran adalah teknik kritikal dalam kerja mikrobiologi. Pensterilan lengkap di satu tangan dan pencegahan pencemaran di sisi lain adalah dua aspek teknik aseptik. Di samping itu, kita mesti menghalang mikroorganisma di bawah kajian, terutamanya mikroorganisma patogen atau mikroorganisma kejuruteraan genetik yang tidak wujud, dari melarikan diri dari bekas eksperimen kita ke dalam persekitaran luaran. Untuk tujuan ini, dalam mikrobiologi, terdapat banyak langkah.
Bilik steril biasanya sebuah bilik kecil yang ditubuhkan khas di makmal mikrobiologi. Boleh dibina dengan kepingan dan kaca. Kawasan ini tidak boleh terlalu besar, kira-kira 4-5 meter persegi, dan ketinggiannya harus kira-kira 2.5 meter. Bilik penampan harus ditubuhkan di luar bilik steril. Pintu bilik penampan dan pintu bilik steril tidak boleh menghadapi arah yang sama untuk mengelakkan aliran udara daripada membawa bakteria pelbagai. Kedua -dua bilik steril dan bilik penampan mestilah kedap udara. Peralatan pengudaraan dalaman mesti mempunyai peranti penapisan udara. Lantai dan dinding bilik steril mesti licin, sukar untuk menyimpan kotoran dan mudah dibersihkan. Permukaan kerja mestilah tahap. Kedua -dua bilik steril dan bilik penampan dilengkapi dengan lampu ultraviolet. Lampu ultraviolet di bilik steril adalah 1 meter dari permukaan kerja. Kakitangan yang memasuki bilik steril harus memakai pakaian dan topi yang disterilkan.
Pada masa ini, bilik steril kebanyakannya wujud di kilang -kilang mikrobiologi, sementara makmal umum menggunakan bangku bersih. Fungsi utama bangku bersih adalah menggunakan peranti aliran udara laminar untuk menghilangkan pelbagai habuk kecil termasuk mikroorganisma di permukaan kerja. Peranti elektrik membolehkan udara melalui penapis HEPA dan kemudian masukkan permukaan kerja, supaya permukaan kerja sentiasa disimpan di bawah kawalan udara steril yang mengalir. Selain itu, terdapat tirai udara berkelajuan tinggi di sebelah dekat ke luar untuk mengelakkan udara bakteria luaran daripada memasuki.
Di tempat yang mempunyai keadaan yang sukar, kotak steril kayu juga boleh digunakan dan bukannya bangku bersih. Kotak steril mempunyai struktur mudah dan mudah bergerak. Terdapat dua lubang di bahagian depan kotak, yang disekat oleh pintu tarik-tarik apabila tidak beroperasi. Anda boleh memanjangkan tangan anda semasa operasi. Bahagian atas depan dilengkapi dengan kaca untuk memudahkan operasi dalaman. Terdapat lampu ultraviolet di dalam kotak, dan perkakas dan bakteria boleh dimasukkan melalui pintu kecil di sebelah.
Teknik operasi aseptik kini bukan sahaja memainkan peranan penting dalam penyelidikan mikrobiologi dan aplikasi, tetapi juga digunakan secara meluas dalam banyak bioteknologi. Sebagai contoh, teknologi transgenik, teknologi antibodi monoklonal, dll.
Masa Post: Mar-06-2024